plasmid ·¹Æ÷Æ® ÀÚ¿¬°úÇÐ °Ë»ö°á°ú
14 °Ç (1/1 ÂÊ)
»ó¼¼Á¶°Ç 
 
ÆÄÀÏÁ¾·ù 
|
»ýÈÇÐ »ýÈÇнÇÇè »ý¹°ÇÐ »ý¹°ÇнÇÇè plasmid DNA Extraction ÃßÃâ miniprep Maxiprep / ÀÚ¿¬°úÇкΠ¼ö¼®ÀÇ ½ÇÇè·¹Æ÷Æ® ½Ã¸®Áî¿¡ ¿À½Å °ÍÀ» ȯ¿µÇÕ´Ï´Ù. ¿©·¯°¡Áö ¼Ò½º¸¦ Ãѵ¿¿øÇÏ¿© ÇØ´ç ½ÇÇè¿¡ ´ëÇÑ ÀÌ·Ð ¹× ¹è°æÁö½ÄÀ» Á¶»çÇÏ°í, ½ÇÇè ¹æ¹ý°ú °á°ú, ÅäÀÇ¿¡ ÇØ´çÇÏ´Â ºÎºÐÀº ÃÖ´ëÇÑ Àü¹®Áö½ÄÀ» »ì¸®¸é¼µµ ¿©·¯ºÐÀÌ ÀÌÇØÇϱâ ÁÁµµ·Ï »ó¼¼ÇÏ°í °¡µ¶¼º ÀÖ°Ô ÀÛ¼ºÇß´Ù°í ÀÚºÎÇÕ´Ï´Ù. ¿©·¯¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
9p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
´ëÀå±ÕÀ¸·ÎºÎÅÍ plasmid DNA ÃßÃâ (DNA mini extraction) ¿¹ºñº¸°í¼ÀÔ´Ï´Ù. / 1. ½ÇÇè¸ñÀû 2. ½ÇÇèµµ±¸ ¹× Àç·á 3. ½ÇÇè¿ø¸® 4. ½ÇÇè¹æ¹ý / 1. ½ÇÇè¸ñÀû : prepÀº ¡®preparation¡¯ÀÇ ÁÙÀÓ¸»·Î DNA¸¦ ¼Ò·®À¸·Î ÃßÃâÇÑ´Ù´Â Àǹ̸¦ °¡Áø´Ù. plasmid¸¦ ÃßÃâÇÏ´Â ¹æ¹ýÀ¸·Î´Â ±âº»ÀûÀ¸·Î ¿©·¯ °¡Áö°¡ ÀÖÁö¸¸ ±× °¡¿îµ¥ ´ëÇ¥ÀûÀÎ ¹æ¹ýÀ¸·Î alkaline lysis (denaturation) method¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ°í ÀÖ´Ù¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
3p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
¡¥posonÀÇ ¾ç ¸»´ÜÀº ÀüÀ§¿¡ ÇʼöÀûÀÓ 5.3 µÎ plasmid °£ÀÇ ÀüÀ§°úÁ¤¿¡¼ transposonÀÇ º¹Á¦ plasmid°£ ÀüÀ§´Â 10-7 ºóµµ·Î ³ªÅ¸³² replicon fusionµµ 10-7 ºóµµ·Î ³ªÅ¸³² transposonÀ» µÎ »çº» Áö´Ï¸ç Á¤¹Ýº¹µÇ¸ç ¼ö¿ëü plasmid¿Í °ø¿©Ã¼ plasmidÀÇ Á¢ÇÕÁöÁ¡¿¡ À§Ä¡ÇÑ´Ù. 5.4 Tn3 ÀüÀ§ÀÇ Áß°£Ã¼ ·Î¼ »óÈ£ ÅëÇÕü 3°³ÀÇ À¯ÀüÀÚ Áö´Ô TnpA: transposase¸¦ ¾ÏÈ£È, »óÈ£ ÅëÇÕüÀÇ Çü¼º¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
2p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
Ligation °á°ú È®ÀÎÀ» À§ÇÑ Á¦ÇÑÈ¿¼Ò ¹ÝÀÀ (insert DNAÀÇ È®ÀÎ) ¿¹ºñº¸°í¼¿Í °á°úº¸°í¼ ÇÕº»ÀÔ´Ï´Ù. / 1. ½ÇÇè¸ñÀû 2. ½ÇÇèµµ±¸ ¹× Àç·á 3. ½ÇÇè¿ø¸® 4. ½ÇÇè¹æ¹ý 5. ½ÇÇè°á°ú 6. °íÂû / [Á¦ÇÑÈ¿¼Ò¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ DNAÀÇ Àý´Ü] 1. ½ÇÇè¸ñÇ¥ : plasmid¿Í À¯ÀüÀÚ ´ÜÆíÀº ligationÀ» ÅëÇØ °áÇյǴµ¥ Ç×»ó ¿øÇÏ´Â À¯ÀüÀÚ°¡ °áÇյǴ °ÍÀº ¾Æ´Ï´Ù. À¯ÀüÀÚ°¡ »ðÀÔµÇÁö ¾ÊÀº ä plasmid°¡ self li¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
4p age   | 
1,100 ¿ø
|
|
|
|
|
|
Çö󽺹̵忡 ´ëÇØ Á¶»çÇÑ ÀÚ·áÀÔ´Ï´Ù. PLASMID / ¼ ·Ð º» ·Ð 1. Çö󽺹̵åÀÇ Æ¯¼º 2. ÇÃ¶ó½º¹Ìµå ¹éÅÍ 3. Çö󽺹̵åÀÇ Á¦°Å 4. Çö󽺹̵åÀÇ Áֿ䱺 5. Çö󽺹̵åÀÇ °ËÃâ°ú ºÐ¸® 6. Á¢ÇÕ (1) Lederberg¿Í TatumÀÇ ½ÇÇè (2) Hfr (high frequency recombination) °èÅë°ú À¯ÀüÀÚ Áöµµ ÀÛ¼º (3) F Çö󽺹̵å DNAÀÇ ÇÕ¼º°ú Àü´Þ (4) »ðÀÔ 7. ¼¼±Õ palsmidÀÇ ¼ºÁú 8. ÇÃ¶ó¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
29p age   | 
3,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
¡¥. ±×¸®ÇÏ¿©, À¯ÀüÀÚ Á¶ÀÛ±â¼úÀº ¼¼±ÕÀÇ À¯ÀüÀÚ Çؼ®, plasmidÀÇ À¯ÀüÀÚÇؼ®, virusÀÇ À¯ÀüÀÚÇؼ®, ¼¼Æ÷ÀÇ À¯ÀüÀÚÇؼ®¿¡ Å« µµ¿òÀ» ÁÖ¾ú´Ù. ©è ÀǾàÇ°ºÐ¾ß ÀÌ´Â À¯ÀüÀÚ Á¶ÀÛ±â¼úÀÌ °¡Àå È°¹ßÇÏ°Ô ¿¬±¸µÇ°í ÀÖ´Â ºÐ¾ßÀ̸ç, ´ëºÎºÐÀÌ ´ëÀå±ÕÀÇ À¯ÀüÀÚ Á¶ÀÛÀ¸·Î ´ÙÀ½ÀÇ °ÍµéÀ» »ý»êÇÑ´Ù. 1) Somatostatin »ý»ê SomatostatinÀº 13°³ ¾Æ¹Ì³ë»êÀ¸·Î ±¸¼ºµÈ peptide HormonÀ¸·Î ¼±´Ü¹è´ëÁõ, ±Þ¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
10p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
¡¥r cut information 4) Ligated plasmid refernce 5) Sequencing result (raw) 6) Edited sequencing result 7) Editing process 5. Discussion / [½æ³×ÀÏÀ» È®ÀÎÇØ ÁÖ¼¼¿ä] |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
10p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
¡¥smid DNAÀÇ Â÷ÀÌÁ¡°ú °¢ DNAÀÇ ÃßÃâ¹æ¹ý 5.plasmidÀÇ Á¤ÀÇ¿Í ±¸Á¶ÀûÀΠƯ¡¿¡ ´ëÇØ ¼³¸íÇϽÿÀ. 6.Á¦ÇÑÈ¿¼Ò Àý´ÜºÎÀ§ÀÇ ÁöµµÀÛ¼º¹ý¿¡ ´ëÇØ ¼³¸íÇϽÿÀ. ( º¹»ç¹°¿¡ Àß ¼³¸íµÇ¾î ÀÖÀ½.) 7. transformant¸¦ screeningÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ¹æ¹ý¿¡ ´ëÇØ ¼³¸íÇϽÿÀ. 8. Southern blotÀÇ »ç¿ë¸ñÀûÀº 9 .DNA transfer ¹æ¹ý¿¡ ´ëÇØ ¼³¸íÇϽÿÀ 10. DIG ¹ß»ö±âÀü¿¡ ´ëÇØ ¼³¸íÇϽÿÀ. 11. Ç׿ø-Ç×ü¹ÝÀÀ¿¡¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
9p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
¡¥³ªÀÇ °Å´ëÇÑ circular DNA·Î Á¸ÀçÇÏ°í ´ëºÎºÐ plasmid¸¦ °¡Áö°í ÀÖ´Ù. (plasmid´Â Ç×»ýÁ¦ »ý»ê/³»¼º¿¡ °ü°èµÈ À¯ÀüÀÚ) »ý¸í ÁøÈÀÇ °úÁ¤¿¡¼ ÃâÇöÇÑ ÃÖÃÊÀÇ ¼¼Æ÷´Â ¿øÇÙ ¼¼Æ÷À̸ç, ÇöÀç Áö±¸»ó¿¡ Á¸ÀçÇÏ´Â ¸ðµç »ý¹°Àº 30¾ï ³â ÀÌ»ó Àü¿¡ ÅÂ¾î³ ¿øÇÙ ¼¼Æ÷°¡ ±â¿øÀ̶ó°í »ý°¢µÇ°í ÀÖ´Ù. ¿øÇÙ ¼¼Æ÷¿¡¼ »ý±ä »ý¹°À» ¿øÇÙ »ý¹°À̶ó Çϸç, ¡®¼¼±Õ(ÁøÁ¤ ¼¼±Õ)¡¯°ú ¡®°í¼¼±Õ¡¯ÀÇ µÎ ±×·ìÀ¸·Î¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
8p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|
|
ÀÚ¿¬°úÇкΠ¼ö¼®ÀÇ ½ÇÇè·¹Æ÷Æ® ½Ã¸®Áî¿¡ ¿À½Å °ÍÀ» ȯ¿µÇÕ´Ï´Ù. ¿©·¯°¡Áö ¼Ò½º¸¦ Ãѵ¿¿øÇÏ¿© ÇØ´ç ½ÇÇè¿¡ ´ëÇÑ ÀÌ·Ð ¹× ¹è°æÁö½ÄÀ» Á¶»çÇÏ°í, ½ÇÇè ¹æ¹ý°ú °á°ú, ÅäÀÇ¿¡ ÇØ´çÇÏ´Â ºÎºÐÀº ÃÖ´ëÇÑ Àü¹®Áö½ÄÀ» »ì¸®¸é¼µµ ¿©·¯ºÐÀÌ ÀÌÇØÇϱâ ÁÁµµ·Ï »ó¼¼ÇÏ°í °¡µ¶¼º ÀÖ°Ô ÀÛ¼ºÇß´Ù°í ÀÚºÎÇÕ´Ï´Ù. ¿©·¯ºÐÀÇ ½ÇÇè°ú º¸°í¼ ÀÛ¼º¿¡ Å« µµ¿òÀÌ µÇ±æ ¹Ù¶ø´Ï´Ù. / 1. Purpose 2. Theory 1) Restri¡¦ |
|
ÀÚ¿¬°úÇÐ  | 
11p age   | 
1,000 ¿ø
|
|
|
|
|