9 .DNA transfer ¹æ¹ý¿¡ ´ëÇØ ¼³¸íÇϽÿÀ.
1) ¸ð¼¼°ü Çö»óÀ» ÀÌ¿ëÇÑ À̵¿(Capillary transfer)
ÈçÈ÷ Southern blot ȤÀº Southern hybridization À̶ó ºÒ¸®¿ì´Â ¹æ¹ýÀ¸·Î Southern(1975)¿¡ ÀÇÇØ °í¾ÈµÇ¾ú´Ù. Agarose gel ³»¿¡¼ Å©±âº°·Î ºÐ·ùµÈ DNA Á¶°¢µéÀÌ ¸ð¼¼°ü Çö»ó¿¡ ÀÇÇÑ ¿ë¾×ÀÇ È帧À» Ÿ°í À¯ÃâµÇ¾î solid supportÀÇ Ç¥¸é¿¡ ÃàÀûµÇµµ·Ï ÇÏ´Â ¹æ¹ýÀÌ´Ù. ¸ð¼¼°ü Çö»óÀº ´ÙÀ½ ±×¸²¿¡¼¿Í °°ÀÌ ¿©·¯°ãÀÇ Á¾ÀÌ Èí¼öÁö¸¦ Ÿ°í ¿ë¾×ÀÌ È帣°Ô µÇ¾î Çü¼ºµÇ°Ô µÈ´Ù.
À̶§ DNAÀÇ À̵¿È¿À²Àº DNA Á¶°¢ÀÇ Å©±â¿Í agarose gelÀÇ ³óµµ¿¡ µû¶ó º¯ÇÏ°Ô µÈ´Ù. 1 kb ÀÌÇÏÀÇ ÀÛÀº Å©±âÀÇ DNA´Â 0.7% gel·ÎºÎÅÍ ¾à 1½Ã°£ À̳»¿¡ ½±°Ô À̵¿µÈ´Ù. ±×·¯³ª ´õ Å« Å©±âÀÇ DNAÀÇ À̵¿Àº À̵¿¼Óµµ°¡ ´Ê°í ±× È¿À²µµ ¶³¾îÁö°Ô µÈ´Ù. ¿¹¸¦ µé¾î 15 kb ÀÌ»óÀÇ DNA¸¦ ¸ð¼¼°ü Çö»óÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© À̵¿½ÃÅ°±â À§Çؼ´Â 18½Ã°£ ÀÌ»óÀÇ ½Ã°£ÀÌ ÇÊ¿äÇÏ¸ç ±×³ª¸¶ ¿ÏÀüÈ÷ ÀÌ·ç¾îÁöÁö´Â ¾Ê´Â´Ù. ÀÌ·± Å« Å©±âÀÇ DNA À̵¿Àº gelÀÌ Å»¼öµÇ±â Àü¿¡ ¾ó¸¶³ª gel·ÎºÎÅÍ À¯ÃâµÇ´À³Ä¿¡ µû¶ó °áÁ¤µÇ´Âµ¥, ±×°ÍÀº À̵¿ °úÁ¤Áß¿¡ ¿ë¾×ÀÌ reservoir·ÎºÎÅÍ È帣±âµµ ÇÏÁö¸¸ gel ÀÚü¿¡ ÀÖ´ø ¿ë¾×ÀÌ Èê·¯³ª¿Í Å»¼öµÇ¸é¡¦(»ý·«)
|