1. ½ÇÇè°á°ú
½ÇÇè °á°ú´Â Competent CellÀÇ Çü¼º°úÁ¤°ú ±× È¿À²¼ºÀ» Æò°¡ÇÏ´Â µ¥ Áß¿äÇÑ µ¥ÀÌÅ͸¦ Á¦°øÇÑ´Ù. Competent CellÀ» Á¦Á¶ÇÏ´Â °úÁ¤¿¡¼, ÀϹÝÀûÀ¸·Î E. coliÀÇ ÀüÅëÀûÀÎ ¿Ãæ°Ý ¹æ¹ý ¶Ç´Â CaCl©ü ó¸® ¹æ¹ýÀÌ »ç¿ëµÇ¸ç, ÀÌ°ÍÀÌ ¼¼Æ÷º®ÀÇ Åõ°ú¼ºÀ» ³ô¿© ¿ÜºÎ DNAÀÇ À¯ÀÔÀ» °¡´ÉÇÏ°Ô ¸¸µç´Ù. À̹ø ½ÇÇè¿¡¼´Â ÁÖ·Î CaCl©ü¸¦ »ç¿ëÇÑ ¹æ¹ýÀ¸·Î Competent CellÀ» ÁغñÇÏ¿´´Ù. ½ÇÇè °úÁ¤¿¡¼ ÁغñÇÑ Competent CellÀ» Çö󽺹̵å DNA¿Í ÇÔ²² È¥ÇÕÇÑ ÈÄ, ¿Ãæ°Ý °úÁ¤À» ÅëÇØ DNA°¡ ¼¼Æ÷ ³»·Î µé¾î°¥ ¼ö ÀÖµµ·Ï ÇÏ¿´´Ù. ÀÌÈÄ ¼¿ ¹è¾ç ¸Åü¸¦ »ç¿ëÇÏ¿© ¼¼Æ÷¸¦ ȸº¹ÇÏ°í, ¼±ÅÃÀû ¹èÁö¸¦ »ç¿ëÇÏ¿© ÇüÁúÀüȯµÈ ¼¼Æ÷ÀÇ ¼ö¸¦ È®ÀÎÇÏ¿´´Ù. ÇüÁúÀüȯ ÈÄ, ¼±Á¤ ÈÄ ¹è¾çÇÑ Çö󽺹̵å DNA°¡ ÇüÁúÀüȯµÈ ¼¼Æ÷¿¡¼ ³ªÅ¸³ª´Â ÇüÁúÀ» ºÐ¼®Çϱâ À§ÇØ ¹èÁö¸¦ ÅëÇÑ ½Ä coloniesÀÇ ¼ö¸¦ Ä«¿îÆ®ÇÏ¿´´Ù. ½ÇÇè °á°ú, ÃÑ 100 ¥ìLÀÇ Competent CellÀ» »ç¿ëÇÏ¿© Çö󽺹̵å DNA¸¦ ÇüÁúÀüȯÇÑ °á°ú, ¾à 200°³ÀÇ ½Ä colonies°¡ °üÂûµÇ¾ú´Ù. ÀÌ´Â ¿ø·¡ÀÇ E. coli ¹è¾ç¿¡¼ÀÇ ±â´ëÄ¡¿Í ºñ±³ÇßÀ» ¶§ »ó´çÈ÷ ³ôÀº È¿À²¼ºÀ» º¸ÀÎ °ÍÀ¸·Î Æò°¡µÈ´Ù. ÇüÁúÀüȯ È¿À²À» °è»êÇϸé, ¾à 0 x 10^6 CFU/¥ìg DNA·Î ¡¦(»ý·«)
|