[세포공학실험] ELISA(Enzyme-linked Immunosorbent Assay) 결과보고서 A0

1.실험 방법

ELISA(Enzyme-linked Immunosorbent Assay)는 특정 항원이나 항체를 정량적으로 측정하기 위한 강력한 면역 분석 방법이다. 실험의 첫 번째 단계로, 고정된 플레이트에 항원 또는 항체를 코팅하는 작업이 이루어진다. 이 과정에서 플레이트의 바닥에 특정 단백질이 달라붙게 되며, 이는 비열적 흡착을 이용하여 이루어진다. 일반적으로 96웰 플레이트를 사용하며, 각 웰에 약 100μL의 시료 또는 완충 용액을 첨가하고, 4도에서 오버나이트 동안 incubate한다. 이를 통해 항원 또는 항체가 플레이트에 잘 고정되게 된다. 다음 단계로는 고정된 항원에 대한 비특이적 결합을 방지하기 위해 차단(step)하는 과정이 필요하다. 이를 위해 차단 용액, 주로 BSA(아보카도 혈청 알부민), 젤라틴 또는 비슷한 단백질 용액을 사용하여 모든 웰을 충분히 덮는다. 차단 과정은 대개 1시간에서 2시간가량 수행하며, 이 과정 후에는 충분히 세척하여 비특이적 결합물질을 제거해야 한다. 세척은 일반적으로 PBS(인산 완충 용액) 또는 PBS-T(PBS + Tween 20)를 이용하여 이루어진다. 차단 후, 특정 항원 또는 항체를 검출하기 위해 1차 항체를 각 웰에 첨가한다. 이 1차 항체…(생략)