1. ½ÇÇè°á°ú
½ÇÇè °á°ú·Î plasmid DNA isolationÀ» ÅëÇØ ¾òÀº °á°ú´Â ÃÑ ¼¼ °¡Áö Áß¿äÇÑ ´Ü°è¿¡¼ ³ªÅ¸³´Ù. ù°, ¹è¾çÇÑ ¼¼Æ÷¿¡¼ plasmid DNA¸¦ ¼º°øÀûÀ¸·Î ÃßÃâÇÏ¿´´Ù. À̸¦ À§ÇØ »ç¿ëÇÑ ±ÕÁÖ¿¡¼ ¼¼Æ÷¸¦ ¼öÈ®ÇÏ°í, ÀûÀýÇÑ ¿ë¸Å·Î ¿ëÇØÇÏ¿´´Ù. ¿ø½ÉºÐ¸®¸¦ ÁøÇàÇÑ °á°ú, ¼¼Æ÷°¡ Æı«µÇ°í plasmid DNA°¡ »óÃþ¾×À¸·Î ºÐ¸®µÇ¾ú´Ù. ÀÌ ´Ü°è¿¡¼ plasmid°¡ ¿ÏÀüÈ÷ ºÐ¸®µÇÁö ¾ÊÀ» °æ¿ì, ÀÌÈÄÀÇ ºÐ¼®¿¡¼ °á°ú¿¡ ¿µÇâÀ» ÁÙ ¼ö Àֱ⠶§¹®¿¡ ½ÅÁßÇÏ°Ô ÁøÇàÇÏ¿´´Ù. µÑ°, ÃßÃâÇÑ plasmid DNAÀÇ Á¤Ã¼¼º°ú ¼øµµ¸¦ È®ÀÎÇϱâ À§ÇØ absorbance ÃøÁ¤À» ½Ç½ÃÇÏ¿´´Ù. UV-VIS ºÐ±¤±â¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© 260nm¿Í 280nm¿¡¼ÀÇ Èí±¤µµ¸¦ ±â·ÏÇÏ¿´´Ù. ÀÌ °á°ú¸¦ ¹ÙÅÁÀ¸·Î A260/A280 ºñÀ²À» °è»êÇÏ¿´´Ù. A260/A280 ºñÀ²ÀÌ 8¿¡¼ 0 »çÀÌ¿¡ À§Ä¡ÇÒ °æ¿ì °í¼øµµÀÇ DNA°¡ ÃßÃâµÇ¾úÀ½À» ÀǹÌÇÑ´Ù. º» ½ÇÇè¿¡¼µµ ÀÌ ºñÀ²ÀÌ ¾à 85·Î ³ªÅ¸³µÀ¸¸ç, ÀÌ´Â plasmid DNAÀÇ ¼øµµ°¡ ÀûÀýÇÑ ¼öÁØÀÓÀ» º¸¿©ÁØ´Ù. Èí±¤µµ ÃøÁ¤ °á°ú´Â plasmidÀÇ ¿À¿°µµ¸¦ Æò°¡ÇÏ´Â µ¥ Áß¿äÇÑ ÁöÇ¥·Î »ç¿ëµÈ´Ù. ¼Â°, agarose Á© Àü±â¿µµ¿À» ÅëÇØ plasmid DNAÀÇ Å©±â¿Í ÇüŸ¦ ºÐ¼®ÇÏ¿´´Ù. ÃßÃâµÈ DNA »ùÇÃÀ» 1% agarose Á©¿¡ ÁÖÀÔÇÏ°í Àü±â¡¦(»ý·«)
|