Gram-staining

1. 이론적 배경

그램 염색법은 각종 검체 및 배양집단의 현미경적 검사에 이용되며 미생물에 의한 감염여부를 조기에 진단할 수 있게 해준다. 그램 양성균의 경우 세포벽이 두꺼운 peptidoglycan layer와 풍부한 teicoic acid로 이루어져 있어서 organic decolorizer(탈색제)로 탈색 시 쉽게 탈색되지 않으며 따라서 염색액 crystal violet이 계속 세균내에 남아있어서 보라색으로 염색된다. 그램 음성균은 peptidiglycan layer가 단일충으로 되어있으며 세포벽은 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide(LPS)로 이루어져 있어 탈색제에 의해 crystal violet이 쉽게 탈색된다. 따라서 대조 염색액인 safranin O로 염색되어 붉은색을 나타낸다.
그램 염색의 결과를 여러 가지 방법으로 설명할 수 있다. 그램 양성균과 그램 음성 균은 기본적으로 세포벽의 물리적인 특성이 서로 다르다. 그램 양성균에서 세포벽을 제거하면 그램 음성 균처럼 염색된다. 펩티도글리칸 자체가 염색되는 것은 아니고 그램 양성균의 두꺼운 펩티도글리칸 층이 크리스탈 바이올렛이 제거되는 것을 막는 것으로 생각된다. 그램 염색을 할 때 먼저 크리스탈 바이올렛으로 세균을 염색한 다음 요오드…(생략)