ÀÏ¹Ý »ý¹°ÇÐ ½Ç½À
`immunohistochemistry¿Í À§ ¾ç¼º¹ÝÀÀ °æ·Î Â÷´Ü`
¸é¿ªÁ¶Á÷ÈÇÐ- Á¶Á÷À̳ª ¼¼Æ÷³»ÀÇ Æ¯Á¤ Ç׿øÀ» Ç×ü·Î Ç¥½Ã ÈÄ °üÂûÇÏ´Â ±â¼ú.
¢Ó ½ÇÇè ¸ñÀû
1) Ç×ü¹ÝÀÀÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ½Å°æ¼¼Æ÷¸¦ ¿°»öÇغ»´Ù.
2) ½ÇÇèÀ» ÁغñÇÏ´Â °úÁ¤¿¡¼ À§ ¾ç¼º¹ÝÀÀÀÇ °æ·Î¸¦ »ý°¢ÇÏ°í Â÷´ÜÇÏ´Â
¼³°è¸¦ ¹è¿î´Ù.
¢Ó Áغñ¹°
Cryotomy ÀýÆíÀ» À§ÇØ
PBS Á¶Á÷À» ¾Ä°Å³ª Á¶Á÷À» ´ã±¼ ¿ë¾×À» Èñ¼®½Ãų ¶§ »ç¿ë.
Hydrogen peroxide QuenchingÀ» ÅëÇØ Á¶Á÷ ³»¿¡ ÀÖ´Â °ú»êȼÒü¿¡ ÀÇÇÑ À§ ¾ç¼º¹ÝÀÀÀ» ¸·°í, ÈÄ¿¡ DAB¸¦ »êȽÃÄÑ ¿°»öÇÏ´Â ¿ªÇÒ.
Normal goat serum ¼¼Æ÷¸·¿¡¼ ³ªÅ¸³¯ ¼ö ÀÖ´Â À§ ¾ç¼º¹ÝÀÀ °æ·Î Â÷´Ü
DAB ¿°»ö¹°Áú. ¹ß¾Ï¹°ÁúÀÌ´Ù.
Ç×ü Primary antibody Mouse Anti-GFAP antibody(Ig G)
Secondary antibody Goat Anti-mouse Ig G antibody
¢Ó ½ÇÇè Çϱâ Àü¿¡
À§ ½ÇÇèÀº Ç¥Àû¼¼Æ÷¿¡¼¸¸ ¹ß°ßµÇ´Â ´Ü¹éÁú¿¡ 1Â÷ Ç×ü¸¦ ºÙÀÌ°í, ±× 1Â÷ Ç×ü¿¡ 2Â÷ Ç×ü¸¦ ºÙÀÎ ÈÄ, 2Â÷ Ç×ü¿¡ ºÙ¾îÀÖ´Â peroxidase¿¡ ÀÇÇØ DAB°¡ H©üO©ü¿Í ¡¦(»ý·«)
¨ç Quenching(´ã±×´Â °úÁ¤)
¨è Block
1. Á¶Á÷À» 30§·Î cryocutÇÑ ÈÄ, PBS¿ë¾×¿¡ 5ºÐ°£ ¾Ä´Â´Ù.
2. °ú»êȼö¼Ò¸¦ 0.3%·Î ÇÏ¿© Á¶Á÷À» 15ºÐ°£ Quenching.
3. PBS¿¡ 5ºÐ¾¿, 3¹ø ¾Ä´Â´Ù.
4. Normal goat serum 5%¿ë¾×¿¡ 1½Ã°£µ¿¾È ´ã°¡µÐ´Ù. (Block)
5. 1Â÷ Ç×ü ¼ö¿ë¾×À» ÁغñÇÑ´Ù. 300§¡
6. 1Â÷ Ç×ü ¼ö¿ë¾×¿¡ Á¶Á÷À» ´ã±¸°í 4¡É¸¦ À¯ÁöÇÏ¿© ÇÏ·ç µ¿¾È µÐ´Ù.
|