[자연과학] 일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서

일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서

1. Abstract

이번 실험은 우리가 이론상으로만 알고 있던 DNA를 직접 추출해 눈으로 관찰해 봄으로써 DNA에 대한 이해를 높이고 겔로딩 과정을 익혀볼 수 있는 실험이다. 그래서 이번 실험에는 구하기가 쉽고 실험하기 안전한 대장균의 DNA를 직접 추출해보고, 전기영동을 한 뒤 UV lamp를 통해 관찰해 보았다.
먼저, 대장균을 원심 분리시켜서 추출해 낸 뒤 EDTA 용액을 통해 세포벽을 제거하고, 10% SDS 용액을 이용해 세포막을 파괴시킨 다음 NaOH 용액을 사용해 DNA를 용해시킨다. 그러면 모든 세포소기관 및 DNA가 수용액 속에 전부다 녹아들어 용액이 맑아지게 되는데 여기에 NaCl과 95% EtOH를 넣어주어 DNA가 뭉쳐지도록 만들어 DNA를 침전시킨다. 그 후 침전된 DNA를 유리막대로 감아 추출해낸 뒤 DNA에 loading buffer을 첨가하고 겔 전기영동을 시킨다. 그렇게 완료된 겔 전기영동을 UV lamp를 통해 관찰해 보면 DNA와 Plasmid, RNA 등을 관찰해볼 수 있다.

2. Introduction

대장균은 주로 포유류의 장속에 사는 세균으로, 특히 대장에 많이 존재한다 하여 대…(생략)