PCR과 Gel running을 이용해 대장균의 plasmid 관찰실험 / DNA technology Abstract 생명체의 유전정보를 담고 있는 DNA는 그 중요성을 인정받아 21세기 유전공학 연구에 있어 연구가 많이 진행된 대상 중 하나이다. 그래서 이번 module 3에선 DNA 연구에 있어 흔하게 사용되는 DNA cloning, colony PCR, gel running 기법에 대해 알아보고자 한다. 이를 위해 대장균을 competent cell로 변형시켜 플라스미드를 재조합하는 단계, white colony를 colony PCR하는 단계, restriction enzyme으로 DNA를 잘라 gel running 하는 단계 순…
[공학,기술] 실험보고서 - Plasmid DNA Purification / Plasmid DNA Purification 1. 서론 Plasmid는 bacteria 세포의 염색체와는 별도로 존재하면서 self-replication을 할 수 있는 원형 DNA 분자로 적은 수의 gene을 가지고 있다. 이 plasmid는 유전자 재조합 시 재조합 DNA 조작을 위한 vector DNA(숙주에 이종의 DNA를 운반하는 DNA)로 사용되며 원하는 DNA 단편을 넣어 gene cloning 등에 널리 이용된다.1) Plasmid는 주로 대장균 세포에서 증식되며 vector DNA로 사용되기 위하여 대량 증식된 대장균 세포로부터 분리하여 사용하…
Vector -원하는 염색체를 실어서 보내는 것이다. -복제가 되어야하고, 유전자를 넣을 수 있어야 한다. Plasmid -플라스미드란 세포 내에서 발견되는 염색체 외 DNA분자로서 독립적 복제 능력을 가지는 유전인자들의 집합체이다. -유전자 재조합 기술에 있어서 가장 중요한 요소가 되는 대부분의 운반체가 플라스미드로부터 만들어진다. PlasmidPurification / . / 1. 실험 목적 ①plasmid의 화학적 분리법을 익힌다. ②plasmid의 정의와 특징을 알아본다. ③균의 pure culture에 대해 알아본다. ④전기영동, 원심분리 등의 사용법을 익힌다. 2.실험 원리 ①Bacterial DNA는 plasmid D…
‥ss 1) Bacteria Culture 2) Plasmid Prep. 3) 전기영동 4. sequence 5. Discussion 6. conclusion / 미리 준비한 박테리아를 증식시킨다. 이 박테리아에는 재조합 plasmid가 이미 들어 있는 상태이다. 박테리아를 배양하여 충분한 양의 plasmid가 확보되면 prep. 한다. 추출한 plasmid는 관찰하기 용이하도록 제한효소 처리를 할 수 있다. 이 plasmid를 전기영동으로 관찰한다. 3. process 1) Bacteria Culture 실험에 사용한 박테리아는 가장 많이 사용하는 E.coli 이다. 최적 상태에서 dou
Plasmid의 특징 및 분리에 대한 자료입니다. Plasmid의특징및분리 / 1. Plasmid의 특징 Plasmid는 박테리아 세포 내에 독립적으로 존재하는 환형의 DNA 분자이다. 이들은 대부분 하나 이상의 유전자를 가지고 있으며, 이들 유전자는 종종 숙주세균에 의해 보여지는 유용한 특징을 담당하고 있다. 예를 들어 항생제의 정상적인 독성농도에서 생존하는 능력은 항생제 저항성 유전자를 가진 plasmid가 세균 내에 존재하기 때문이다. 실험실에서 이러한 항생제 저항성은 종종 선별표지(Selection marker)로 이용된다. 모든 plasmid는 복제 개시점(origin of replication)이 될 수 있는 최소한…
대장균으로부터 plasmid DNA 추출 (DNA mini extraction) 예비보고서입니다. / 1. 실험목적 2. 실험도구 및 재료 3. 실험원리 4. 실험방법 / 1. 실험목적 : prep은 ‘preparation’의 줄임말로 DNA를 소량으로 추출한다는 의미를 가진다. plasmid를 추출하는 방법으로는 기본적으로 여러 가지가 있지만 그 가운데 대표적인 방법으로 alkaline lysis (denaturation) method를 이용하고 있다. -alkaline lysis mini prep의 원리 : 가장 보편적으로 쓰이는 방법인 alkaline lysis의 원리는 세균의 세포막을 부수고 DNA만을 분리하는 것이다. 이때 …
본 자료는 E.coli로부터 plasmid DNA를 alkaline lysis를 통해 분리해 내고 분리해 낸 plasmid DNA의 농도를 알아보기 위한 실험의 보고서입니다. PreparationandConcentrationDeterminationofPlasmidDNAfromE.coli-Mini-ScalePreparation / 1. 실험제목 2. 실험날짜 3. 제출자 및 공동 실험자 4. 목적 5. 원리 6. 시약 및 기자재 7. 결과 8. 고찰 9. 참고문헌 / 1. 실험제목 : Preparation and Concentration Determination of Plasmid DNA from E. coli -Min…
Ligation 결과 확인을 위한 제한효소 반응 (insert DNA의 확인) 예비보고서와 결과보고서 합본입니다. / 1. 실험목적 2. 실험도구 및 재료 3. 실험원리 4. 실험방법 5. 실험결과 6. 고찰 / [제한효소를 이용한 DNA의 절단] 1. 실험목표 : plasmid와 유전자 단편은 ligation을 통해 결합되는데 항상 원하는 유전자가 결합되는 것은 아니다. 유전자가 삽입되지 않은 채 plasmid가 self ligation을 할 수도 있고, 다른 유전자가 결합될 수도 있다. 유전자가 삽입되지 않은 plasmid를 가진 세포와 삽입된 plasmid를 가진 세포를 구분하기 위해 Enzyme reaction을 진행한다. …
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![[공학,기술] 실험보고서 - Plasmid DNA Purification](/View/[공학,기술] 실험보고서 - Plasmid DNA Purification_hwp_01_.gif)
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![[실험] Preparation and Concentration Determination of Plasmid DNA from E. coli -Mini- Scale Preparation](/View/[실험] Preparation and Concentration Determination of Plasmid DNA from E coli -Mini- Scale Preparation_hwp_01_.gif)
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