서강대학교 일반생물학실험1 GFP단백질, 단백질 정량

1. Abstract

본 실험에서는 녹색형광단백질(GFP)의 발현과 정량화를 통해 단백질 생물학의 기본 개념을 탐구하였다. GFP는 해양 자개조개에서 유래한 단백질로, 특정 파장의 빛을 흡수하고 발광하는 특성을 가지고 있어 생명과학 분야에서 유용하게 활용되고 있다. 본 실험의 주된 목적은 E. coli의 재조합 DNA 기술을 활용하여 GFP 유전자를 발현한 후, 발현된 GFP 단백질의 정량을 수행하는 것이었다. 이를 통해 단백질의 농도 측정 방법과 단백질의 특성을 이해하고, 나아가 생명체 내에서 단백질이 수행하는 다양한 기능과 역할을 탐색하는 계기가 되었다. 실험 과정은 첫 번째로 E. coli를 이용한 GFP의 발현단계를 포함하였다. 재조합 DNA 기술을 통해 GFP 유전자를 클로닝한 후, E. coli에 도입하여 최적의 발현 조건을 설정하였다. 발현된 GFP는 세균의 세포 내에서 형광을 띄며 관찰되었고, 이는 GFP가 성공적으로 발현되었음을 나타내는 중요한 지표가 되었다. 이후, 발현된 GFP 단백질을 정량하기 위해 UV 흡광광도계를 이용한 측정을 실시하였다. GFP는 특정 파장(488 nm)에서 강한 형광을 발산하며, 이 형광의 세기를 기반으로 단백질의 농도를 정량화하였다.…(생략)