[A0] 서강대 현대생물학실험2 4차 풀레포트 - GFPuv를 이용한 Site-directed mutagenesis의 실습과 DNA sequencing 결과의 분석 연습

1. Abstract

본 실험에서는 GFPuv(green fluorescent protein uv) 유전자를 이용한 Site-directed mutagenesis 기법을 통해 특정 아미노산 잔기를 변형시키고, 그 결과물을 DNA sequencing을 통해 분석하였다. GFPuv는 플루오르를 발산하는 단백질로, 유전자 변형 생학에서 흔히 사용되는 마커 단백질로 알려져 있다. 먼저, 실험에서는 GFPuv의 특정 부위를 대상으로 한 점돌연변이를 유도하기 위해 프라이머를 설계하고, PCR(중합효소 연쇄반응)을 통해 변형된 DNA 가닥을 증폭하였다. 성공적인 변형 DNA의 합성을 검증하기 위해 agarose gel electrophoresis를 실시하였으며, 적절한 크기의 DNA 밴드를 확인하였다. 첫 번째 단계에서 얻어진 변형 DNA를 클로닝하여 벡터에 삽입한 후, 변형된 유전자를 발현하기 위한 배양 과정을 진행하였다. 이후, 최종적으로 클로닝된 DNA의 정확성을 검증하기 위해 DNA sequencing을 실시하였다. 이 과정에서 얻어진 염기서열의 분석을 통해 원하는 돌연변이가 성공적으로 도입되었음을 확인하였다. 본 연구는 Site-directed mutagenesis 기법의 진행 과정과 DNA sequencing을 통한 결과 해석을 통해 유전자 변형 기술의 실질적인 적용…(생략)