1. stage1- Cell culture
Ferritin fusion proteinÀÇ È¿À²ÀûÀÎ ¹ßÇöÀ» À§ÇØ ¼¼Æ÷ ¹è¾ç °úÁ¤Àº ÇʼöÀûÀÌ´Ù. º» ¿¬±¸¿¡¼´Â HEK293 ¼¼Æ÷ÁÖ¸¦ »ç¿ëÇÏ¿© ferritin À¶ÇÕ ´Ü¹éÁúÀ» »ý»êÇϱâ·Î ÇÏ¿´´Ù. HEK293 ¼¼Æ÷´Â Àΰ£ ½ÅÀå ¼¼Æ÷¿¡¼ À¯·¡ÇÑ ¼¼Æ÷ÁÖ·Î, ´Ü¹éÁú ¹ßÇö¿¡ ÀÖ¾î ³ôÀº È¿À²¼º°ú ¹ø½Ä¼ºÀ» °¡Áö¸ç, À¯ÀüÀÚ Á¶ÀÛ ¶ÇÇÑ ¿ëÀÌÇÏ¿© ´Ü¹éÁú °øÇÐ ¿¬±¸¿¡¼ ÀÚÁÖ »ç¿ëµÈ´Ù. ù ´Ü°è´Â ¼¼Æ÷ ¹è¾ç¿¡ ÇÊ¿äÇÑ ¹èÁöÀÇ ÁغñÀÌ´Ù. DMEM(Dulbecco`s Modified Eagle Medium) ¹èÁö¸¦ »ç¿ëÇÏ¿´À¸¸ç, ÀÌ ¹èÁö´Â °í³óµµÀÇ Æ÷µµ´ç°ú ¾Æ¹Ì³ë»êÀ» Æ÷ÇÔÇÏ°í ÀÖ¾î HEK293 ¼¼Æ÷ÀÇ ºü¸¥ ¼ºÀå°ú Áõ½ÄÀ» Áö¿øÇÑ´Ù. ¹èÁö¿¡´Â 10%ÀÇ FBS(Fetal Bovine Serum)¸¦ Ãß°¡ÇÏ¿´´Ù. FBS´Â ¼¼Æ÷ ¼ºÀå ÀÎÀÚ, È£¸£¸ó, ´Ü¹éÁú µîÀ» Æ÷ÇÔÇÏ°í ÀÖ¾î ¼¼Æ÷ÀÇ »ýÁ¸°ú Áõ½Ä¿¡ µµ¿òÀ» ÁØ´Ù. ¶ÇÇÑ, 1%ÀÇ Ç×»ýÁ¦¸¦ Ãß°¡ÇÏ¿© ¼¼Æ÷ ¹è¾ç °úÁ¤¿¡¼ÀÇ ¿À¿°À» ¹æÁöÇÏ¿´´Ù. ¼¼Æ÷ ¹è¾çÀº 37µµ, 5% CO2ÀÇ »óÅ¿¡¼ ÁøÇàµÇ¸ç, ÀÌ Á¶°ÇÀº HEK293 ¼¼Æ÷ÀÇ ÃÖÀû ¼ºÀå Á¶°ÇÀ¸·Î ¾Ë·ÁÁ® ÀÖ´Ù. ¹è¾çÇöó½ºÅ©¿¡ ¹èÁö¸¦ ¹Ì¸® Ãß°¡ÇÏ°í, 80% Á¤µµÀÇ ¹Ðµµ°¡ ³·¾ÆÁú ¶§±îÁö ¼¼Æ÷°¡ ÀÚ¶óµµ·Ï °üÂûÇÏ¿´´Ù. ¼¼Æ÷ÀÇ »óÅ´ Çö¹Ì°æÀ» ÅëÇØ Á¤±âÀûÀ¸·Î °Ë¡¦(»ý·«)
|