ferritin fusion protein expression 결과보고서(논문형) A＋ 받은 자료입니다.

1. stage1- Cell culture

Ferritin fusion protein의 효율적인 발현을 위해 세포 배양 과정은 필수적이다. 본 연구에서는 HEK293 세포주를 사용하여 ferritin 융합 단백질을 생산하기로 하였다. HEK293 세포는 인간 신장 세포에서 유래한 세포주로, 단백질 발현에 있어 높은 효율성과 번식성을 가지며, 유전자 조작 또한 용이하여 단백질 공학 연구에서 자주 사용된다. 첫 단계는 세포 배양에 필요한 배지의 준비이다. DMEM(Dulbecco`s Modified Eagle Medium) 배지를 사용하였으며, 이 배지는 고농도의 포도당과 아미노산을 포함하고 있어 HEK293 세포의 빠른 성장과 증식을 지원한다. 배지에는 10%의 FBS(Fetal Bovine Serum)를 추가하였다. FBS는 세포 성장 인자, 호르몬, 단백질 등을 포함하고 있어 세포의 생존과 증식에 도움을 준다. 또한, 1%의 항생제를 추가하여 세포 배양 과정에서의 오염을 방지하였다. 세포 배양은 37도, 5% CO2의 상태에서 진행되며, 이 조건은 HEK293 세포의 최적 성장 조건으로 알려져 있다. 배양플라스크에 배지를 미리 추가하고, 80% 정도의 밀도가 낮아질 때까지 세포가 자라도록 관찰하였다. 세포의 상태는 현미경을 통해 정기적으로 검…(생략)