단백질 정량 분석 실험 ( Biuret, Lowry, Bradford Assay )

모든 종류의 단백질 농도를 결정할 수 있는 완벽한 방법은 없다.
단백질의 양을 정량하기 위해서는 단백질의 본질, 단백질 시료에 있는 다른 성분들의 본질, 정량분석의 신속도 및 정밀도 등에 따라서 적당한 방법을 선택하여야 한다.
단백질을 정량하는 일반적인 방법 (Biuret, Lowry, Bradford Assay)

1. Biuret Assay

1) 원리
2) 기구
◆ 분광광도계 (Spectrophotometer)
흡광광도법으로 빛이 시료용액 중을 통과할 때 흡수나 산란 등에 의하여 강도가 변화하는 것을 이용 흡광도를 측정하여 목적 성분의 농도를 정량하는 방법
3) 시약
① 단백질 표준용액 (BSA)
☞ Bovine serum albumin (소의 혈청 알부민)
10㎎을 증류수 1㎖에 녹인다.
② Biuret 시약
☞ 먼저 CuSO4ㆍ5H2O 1.5g 과 KNaC4H4O6ㆍ4H2O(potassium sodium tartrate) 6.0g을 500㎖의 증류수에 녹이고, 10% NaOH 300㎖를 가한 후 증류수를 가하여 1ℓ로 만든다.
③ 미지시료...