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실험제목 : 미생물 배지 만들기, 멸균 처리법
1. 목적 : 미생물이 자라는데 필요한 배지를 만드는 방법을 습득하고 이때 쓰이는 멸균조작법을 익힌다. 그리고 배지와 미생물의 성장과의 관계를 알아보고, LB배지를 만들어 보자.
2. 실험 날짜 및 상태 : 2012/03/12, 평균기온:-1.6℃
3. 원리
2-1. 배지는 화학적 조성에 따라 합성배지와 복합배지로 나눌 수 있다.
(1) 합성배지(synthetic medium) : 성분명확배지(defined medium). 모든 화학적 조성을 알고 있는 배지를 말한다.
(2) 복합배지(complex media) : 성분불명확배지. 배지 안에 들어가 있는 농도나 조성을 모른다. 이 복합배지에는 펩톤 그리고 추출물과 같이 그 성분을 정확히 할 수 없는 것이 포함된다. 고체배지를 만들 때 넣어주는 것은 Agar(한천)이다.
2-2. 용도에 따른 배지의 종류
(1) 일반배지 - 일반배지는 될 수 있는 한 많은 미생물이 생육 할 수 있도록 제조된 배지 로 세균용으로는 Nutrient broth, Nutrient agar를 곰팡이용으로는 감자한천 배지 등이 이용된다.
(2) 특수배지 - 특수배지는 선택배지, 판별배지, 증식배지, 생화학적 시험용 배지 등이 있 다.
선택배지 : 목적하는 미생물의 생육을 증진시키고 다른 미생물의 생육을 억제되도록 만 들어진 배지로 토양, 병든 조직에서 목적하는 균을 분리 배양하기 위해서 많 은 선택배지가 고안되었다.
판별배지 : 미생물의 생화학적 성질을 이용하여 여러 미생물이 혼재 되어 있는 곳에서 목적으로 하는 미생물을 판별, 확인하기 위해 만들어진 배지이다.
증…(생략)
① 습윤멸균 : 고온, 고압 수증기를 포화시킨 고압멸균기(Autoclave)를 사용하여 내생포자(Endospore)를 포함한 모든 미생물을 사멸시키는 것을 말한다. 내열성 포자는100℃에서도 생존 가능하기 때문에1.1kg/cm2(15 lb/in2)의 증기압을 이용. 기내 온도를121℃로 유지하여 멸균시킨다. 고온에서 변질, 분해되지 않는 배지나 주사기, 피펫 등의 멸균에 사용하며, 보통 121℃에서10~15분 멸균한다.
② 건열멸균 : 가열된 공기를 이용하는 방법으로 증기에 비해 열전도율이 낮아 160℃에서 적어도 1시간 이상 가열하며, 고온에서 견딜 수 있는 면전을 한 시험관이나 플라스크 등의 멸균에 사용하며 주로 유리.
③ 여 과 : 공경이 약 0.2~0.45μm의 멸균된 여과지를 사용하여 제거하는 방법으로 가열에 의해 영향을 받는 물질을 함유한 용액의 멸균에 사용한다. 액체배지만 가능하다.
4. 실험재료
5. 실험방법
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