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1. 실험제목
고체배지제조, 멸균 및 균락 관찰 / 4월 4일
2. 실험목적
고체평판배지의 제조법을 익히고 이 배지를 멸균하면 그 안의 모든 미생물이 사멸하기 때문에 충분한 배양시간이 경과하여도 배지 내에 미생물이 생장할 수 없는 것을 관찰한다. 그러나 잘 멸균된 고체배지에 대장균을 접종하여 순수배양(pure culture)하면 대장균 균락(colony)을 관찰할 수 있음을 확인한다.
3. 실험내용
(1) Reagent and Apparatus
① Apparatus
petri dish고압멸균기 loop(백금이), alcohol lamp, pH meter, 저울, 정량스푼
② Reagent
NameFormulaMolar massM.PB.PDensitySodium chlorideNaCl58.44 g/mol801 °C1413 °C2.165 g/cm3distilled waterH2O18.02 g/mol0 °C100 °C1 g/cm3Hydrogen chlorideHCl36.46 g/mol-114.22 °C-85.05 °C1.490 g/LSodium hydroxideNaOH39.997 g/mol318 °C1388 °C2.13 g/cm3 tryptone 10g/l, yeast extract 5g/l, NaCl 10g/l, Agar 15g/l, distilled water 1.0l, 1N HCl, 1N NaOH
(2) Experimental Procedure
① 고체배지의 제조
1) 1l 배지제조용 병에 증류수를 600~700ml(보통 2/3 정도) 채운다.
2) 배지의 각 성분을 저울로 정량하여 증류수가 든 병에 넣는다(이때 agar는 넣지 않는다).
3) 증류수를 추가하여 총 1l가 되도록 채운다(이때 병주위에 붙은 배지분말을 씻어내면서 채우도록 한다.)
4) 배지성분을 자석 교반기(magnetic stirrer)를 이용해 완전히 녹인 후 pH meter를 이용해서 배지의 pH를 7로 보정한…(생략)
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