Abstract
À̹ø ½ÇÇèÀº »ý¸íÀ» ÀÌ·ç´Â °¡Àå ÇÙ½É ¹°ÁúÀÎ DNA¸¦ RFLP ¹æ¹ýÀ» ÀÌ¿ëÇØ ADH¿Í ALDH2ÀÇ À¯ÀüÀÚÇü ºÐ¼®À» ÇÏ°í °¢Á¾ sequencing ¹æ¹ýÀ» ÀÌ¿ëÇØ polymorphismÀ» ã¾Æ³»±â À§ÇÑ °úÁ¤ÀÇ Ã¹ ´Ü°è·Î DNA¸¦ 3°¡ÁöÀÇ ¼¼Æ÷¿¡¼ ºÐ¸®, ÃßÃâÇس»´Â ½ÇÇèÀÌ´Ù. ºÐ¸®, ÃßÃâÇس¾ ¼¼Æ÷´Â Ÿ¾×ÀÇ »óÇǼ¼Æ÷¿Í ¼ÒÀÇ ±ÙÀ°Á¶Á÷ ¼¼Æ÷, ±×¸®°í Ç÷¾×ÀÇ ¹éÇ÷±¸ ¼¼Æ÷ÀÌ°í °¢ ¼¼Æ÷µéÀº pre-lysis, cell-lysis, isolating gDNA °úÁ¤À» °ÅÃÄ DNA¸¦ ºÐ¸®, ÃßÃâÇس½´Ù. »óÇǼ¼Æ÷ÀÇ °æ¿ì ¸ÕÀú ¼¼Æ÷¸¦ ¾ò±â À§ÇØ 1.5ul tube¿¡ Ÿ¾×(ħ)À» ³Ö¾îÁÖ°í Ÿ¾× ¾ÈÀÇ »óÇǼ¼Æ÷¸¦ NaCl buffer¿Í ¼¯¾îÁØ µÚ, ÃæºÐÈ÷ ¹ÝÀÀ½ÃÅ°°í ¿ø½ÉºÐ¸® ½ÃÄÑ »óÃþ¾×À» Á¦°ÅÇØ cell lysis¸¦ ½Ãų Áغñ¸¦ ¸¶Ä¡°í Çü¼ºµÈ pelletÀ» nuclei lysis buffer¿Í ÇÔ²² voltexing½ÃÄÑ pelletÀ» Ç®¾îÁÖ°í incubation°úÁ¤À» ÅëÇØ ÇÙ¸·À» Á¦°ÅÇÏ°í ´Ü¹éÁú°ú DNA¸¦ ºÐ¸®Çϱâ À§ÇØ PPT buffer¸¦ ³Ö°í sampleÀ» Â÷°©°Ô ÇÏ¿© DNA ÃßÃâÇϱ⿡ ÃÖÀûÀÇ ¿Âµµ »óŸ¦ ¸¸µç µÚ, ¿ø½ÉºÐ¸® ½ÃÅ°¸é gDNA¸¦ isolatingÇϱâ À§ÇÑ Áغñ´Â ³¡³ª°í DNA°¡ ´ã°Ü ÀÖ´Â »óÃþ¾×À» pelletÀÌ µû¶ó¿ÀÁö ¾Ê°Ô ´Ù¸¥ Æ©ºê¿¡ ¿Å±ä µÚ, DNA¸¦ °¡¶ó¾ÉÈ÷±â À§ÇØ isopropanolÀ» ³Ö¾î¡¦(»ý·«)
|